科学家都在追求能够在体外大量扩增造血干细胞
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几十年来,科学家都在寻求可以在体外很多扩增造血干细胞(HSC)的方法。
造血干细胞移植是血液肿瘤等血液病的终极解决方案,也与近几年炽热的基因医治相关。但造血干细胞扩增之难一直限制着临床运用。
现在这个问题有了一个意想不到的回答。美日两国科学家团队联手发现,阻止造血干细胞扩增的是培育基中存在的血清白蛋白,将其替换为一种高分子资料聚乙烯醇(PVA)即可令造血干细胞继续自我更新。在最优培育条件下,小鼠造血干细胞在28天内扩增了近千倍!
该论文宣布在近期的《天然》杂志上[1],通讯作者是斯坦福大学遗传学教授中内启光(Hiromitsu Nakauchi)和东京大学干细胞生物学副教授山崎聪(Satoshi Yamazaki)。
图源 | nature.com
多能自我更新造血干细胞移植后可以再生造血体系,是免疫缺点、白血病在内多种疾病的医治方法,即咱们常说的骨髓移植。
但这种疗法有个问题。造血干细胞数量稀疏,为了确保安安稳植,需要对患者进行放射或化学疗法事前铲除原有的造血干细胞,也便是俗称的清髓。这一方面是为了给新来的供体细胞供给寓居空间,一方面也是为了按捺免疫功用,防止它们误杀外来者。
但清髓谈何容易,免疫按捺、发育缓慢、不育、继发性癌症等副效果凶相毕露,更甭说有些体质较弱或年岁较大的患者底子无法耐受,天然也就无法做骨髓移植。
图源 | pixabay
长期里,科学家们一直在猜测,是不是一次性移植很多的造血干细胞,选用人海战术就可以防止清髓的必要呢?
验证这个猜测很难,刨根究底,问题在于,造血干细胞太难养了。
体外培育造血干细胞,状况与体内十分不同。就算用再贵重的培育基,造血干细胞永久不愿乖乖自我更新,而是很快就分解成前体细胞、失掉干性。科学家们几十年里一直在研讨骨髓微环境[2],企图破解造血干细胞安稳扩增的奥妙,但至今还没人能搞定这个难题[3]。
到底是哪里不可?
研讨者们剖析了培育过程中培育基成分的改变,发现很多细胞因子的呈现促进了干细胞的分解,而这些细胞因子的组成,看起来十分像是发生了先天性免疫反响。研讨者向培育基中添加了地塞米松,细胞因子便减少了。
细胞因子的改变显现,有炎症反响
通过进一步剖析,研讨者发现,没错,培育基是被污染了,坏事儿的居然是培育基中的一种常见成分人血清白蛋白(HSA)。
难怪曾经的研讨都不成功!
已然这样,把HSA替换掉应该就可以了!HSA在培育基中主要是起到载体的效果,研讨者测试了11种高分子化合物,筛选出仅有一种可以支撑造血干细胞成长和坚持干性的物质,聚乙烯醇(PVA)。
值得一提的是,PVA培育出的造血干细胞,在移植试验中乃至还比HSA培育出的活性更强一些。
移植试验:PVA,强,无敌!
这个PVA是什么神物?其实PVA还蛮常见的,比方医疗用的水性凝胶、创伤敷料,各种化妆品的成膜剂,工业建筑资料,可降解生物膜之类。当然,最常见的仍是下面这个东西胶水。
图源 | 我自己
事实上,在日本媒体的采访中,山崎副教授的确说到,用便利店买的液体胶做试验也成功了
#当然咱们不主张用便利店售资料养细胞
##山崎教师这种话怎样可以告知媒体辣
研讨者确认了最佳的条件为100 ng/ml血小板生成因子(TPO),10 ng/ml干细胞因子(SCF),87%水解PVA,纤连蛋白培育。在这个条件下,50个小鼠造血干细胞28天后数量足足增长了8000倍!
这些细胞中造血干细胞频率大约为1:34.3,也便是差不多35个细胞中有一个是功用性造血干细胞,相当于28天培育出了12000个造血干细胞。与既往研讨给出的数据[4]比较,可知造血干细胞自身的扩增大约在236倍到899倍之间。
在试验中,培育继续到57天,细胞仍可坚持干细胞活性和相关表型,也未呈现变老预兆。
凶猛,时刻真的长
不过和前人的认知相同[5],造血干细胞具有显着的功用异质性。研讨者观察到,某些单个造血干细胞只可以发生不到100个细胞,别的一些则可以发生50万以上。
那么人海战术能帮咱们离别清髓吗?
研讨者把扩增后的造血干细胞直接移植给小鼠,包含免疫功用正常的和缺点的。尽管未经清髓处理,但最终小鼠都成长出了来自自体和供体两者的血液/免疫细胞,证明移植成功了。
除了在骨髓按捺方面的运用之外,中内教授还说到,假如在培育过程中运用CRISPR等基因修改技能批改遗传缺点,那么患者用自己的细胞来进行基因医治也是很可行的[6]。
山崎副教授在采访中说;大规模培育可以消除脐带血和造血干细胞缺少的问题,也可以减轻骨髓按捺的担负。假如其他干细胞也可以用相同的方法培育,它可能会为再生医学和基础研讨做出巨大的奉献。
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